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革蘭氏染色液試劑盒的檢驗原理及注意事項

更新時間:2020-07-14   點擊次數(shù):882次
   一:革蘭氏染色液試劑盒的檢驗原理:
  1、通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯(lián)致密。
  2、故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙,因此,能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內。
  3、使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出。
  4、因此通過乙醇脫色后仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
  二:革蘭氏染色液試劑盒的操作步驟:
  1、標本處理:
  有菌部位的標本,如痰液、糞便、各種拭子、創(chuàng)面等可直接涂片。
  無菌部位的標本,如腦脊液、胸水、腹水、膽汁、尿液、關節(jié)液等,應取適量標本,3000rpm離心10min。取沉渣涂片染色。
  2、涂片制作:菌液涂片時,用接種環(huán)沾取菌液點在載玻片上,標本可直接在玻片上涂布;菌落涂片時,先取生理鹽水一滴,置玻片上,用接種針挑取菌落在鹽水中涂布。制作的涂片應自然干燥,并經火焰固定,固定的溫度不宜過高,以玻片背面接觸手背不燙為準,否則可能使細菌形態(tài)改變。將固定后的涂片進行染色。
  三:革蘭氏染色液試劑盒的注意事項:
  1、標本涂片不能太厚,嚴格按操作要求進行。
  2、玻片通過火焰溫度不能太高。
  3、若涂片較厚,應延長脫色時間,直至不再出現(xiàn)紫色為止。
  4、碘液變透明,則不能使用。
  5、水洗時動作要輕柔,沿載玻片對角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。
  總結:染色液試劑盒的檢驗原理及注意事項就由小編分享到這了,看完本文您就應該有了基本的認識和了解相信大家都明白了吧!總的來說,希望對大家有所幫助。
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